Chimica combinatoriale

Chimica combinatoriale

di Pierfausto Seneci

Chimica combinatoriale

sommario: 1. Questioni lessicali. 2. Cenni storici. 3. Definizioni. 4. Applicazioni: a) ricerca farmaceutica; b) catalisi; c) nuovi materiali. 5. Conclusioni. ▭ Bibliografia.

1. Questioni lessicali

L'aggettivo 'combinatoriale' è un brutto neologismo riferito alla chimica e derivante dall'espressione inglese combinatorial chemistry, coniata negli anni ottanta negli Stati Uniti. La traduzione corretta di questa espressione sarebbe probabilmente 'chimica combinatoria', dove l'aggettivo indica appunto la combinazione di molti elementi e ha già notorietà in scienze quali la matematica. Anche l'altrettanto popolare definizione di 'libreria combinatoriale' (v. cap. 3) deriva dalla traduzione doppiamente impropria di combinatorial library; sarebbe corretto, piuttosto, parlare di biblioteca combinatoria.

Sfortunatamente, sin dall'inizio la traduzione di combinatorial utilizzata nel linguaggio chimico è stata 'combinatoriale' ed è oggi difficile pensare di correggere un errore ormai entrato nella pratica comune. Pertanto, pur riconoscendo ai colleghi 'puristi' il diritto di rivendicare come corrette le definizioni chimica combinatoria e biblioteca combinatoria, sembra più ragionevole mantenere le espressioni chimica e libreria combinatoriali per illustrare un'area in grande espansione che sfrutta a piene mani nuove tecnologie e metodiche avanzate.

2. Cenni storici

La sintesi di un composto chimico comporta spesso l'attuazione di vari passaggi di reazione, ognuno dei quali richiede protocolli di purificazione, a volte tediosi e complessi, ma necessari per produrre composti puri per le più svariate applicazioni. Un chimico di sintesi esperto, affiancato da uno o due collaboratori, può ragionevolmente preparare un centinaio di prodotti finiti all'anno. Quasi sempre i prodotti preparati vengono valutati in uno specifico saggio di attività per identificare nuovi principî attivi. La velocità con cui viene compiuto il saggio dei composti deve essere simile alla velocità della loro preparazione, così da permettere una progressione uniforme e senza 'colli di bottiglia' nell'intero progetto di ricerca.

Negli anni ottanta, l'introduzione nella ricerca farmaceutica delle cosiddette tecniche di 'saggio ad alta numerosità', o 'ad alta capacità' (High-Throughput Screening, HTS), ha automatizzato e miniaturizzato i saggi stessi, permettendo ai ricercatori di eseguire fino a svariate migliaia di valutazioni al giorno. Ecco quindi che alla chimica medicinale è stato richiesto di bilanciare la capacità dell'HTS sviluppando tecniche di sintesi ad alta numerosità che permettessero di produrre molti composti in quantità minima, con grande purezza e in tempi molto rapidi. L'insieme delle metodiche chimiche miranti a questo scopo è appunto la chimica combinatoriale; più specificamente, essa indica l'utilizzo di strategie e protocolli sperimentali ad alta produttività per massimizzare gli sforzi sintetici e, quindi, per produrre un gran numero di composti chimici, che vanno a formare le cosiddette 'librerie', sfruttando la permutazione esaustiva dei reagenti utilizzati per effettuare una trasformazione chimica. Ad esempio, la condensazione di 100 acidi e 100 ammine diversi produce, attraverso tutte le possibili combinazioni dei reagenti, una libreria composta da 10.000 ammidi ognuna strutturalmente diversa dalle altre.

A partire dai primi tentativi riportati in letteratura di creare librerie peptidiche sintetiche (v. Furka, 1982; v. Geysen, 1984; v. Houghten, 1985), la chimica combinatoriale applicata alla ricerca farmaceutica si è evoluta e ampliata notevolmente, passando dalla sintesi di librerie oligomeriche (peptidi, nucleotidi) a quella di librerie di molecole organiche più o meno complesse fino ad arrivare a librerie di derivati di prodotti naturali complessi.

Sebbene l'applicazione farmaceutica sia ancora la più conosciuta e affermata, tecniche sintetiche combinatoriali sono diventate di uso pressoché comune anche in altre aree. Fra esse possiamo ricordare la catalisi, la chimica sopramolecolare, la biotecnologia e la diagnostica, la scienza dei materiali. In queste aree i più disparati formati di librerie organiche, inorganiche e biologiche hanno dimostrato la loro utilità accelerando la scoperta di nuovi principî attivi e hanno inoltre fornito a ricercatori accademici e industriali la possibilità di portare a compimento progetti di grande rilevanza scientifica.

3. Definizioni

Una 'libreria combinatoriale' è la singola unità con cui si ha a che fare in chimica combinatoriale. Essa è costituita da un numero di componenti che può andare da alcune decine fino a molti milioni e può essere preparata in vari formati, utilizzando diversi protocolli sperimentali combinatoriali parzialmente o totalmente automatizzati.

Una 'libreria organica' è composta da molecole organiche ed è preparata usando reazioni di chimica organica; una 'libreria inorganica' è costituita da composti inorganici ed è preparata con tecniche di chimica inorganica e di chimica dei materiali; una 'libreria biosintetica' o 'biologica' è composta da oligomeri naturali ed è preparata sfruttando l'azione di microrganismi, di fagi o di particolari enzimi o complessi multienzimatici.

Una 'libreria primaria' è composta da molte migliaia di componenti che costituiscono un insieme variato ed è mirata a individuare principî attivi su un bersaglio (o target) del quale poco o nulla è conosciuto; per questo motivo vengono saggiati molti composti significativamente diversi fra loro, sperando che almeno uno di essi mostri l'attività desiderata. Una 'libreria focalizzata'  è più piccola (da poche decine a poche migliaia di componenti) e i suoi elementi sono fra loro simili e ispirati a una struttura già nota, la cui attività sul bersaglio di interesse potrebbe essere migliorata.

Il concetto di 'diversità (o varietà) chimica' per una libreria combinatoriale non è legato al numero dei suoi componenti, ma piuttosto descrive quanta parte di uno spazio chimico virtuale essa rappresenta: una libreria di 25 composti disposti uniformemente nello spazio chimico è una libreria ad alta diversità, mentre una libreria più grande ma disposta in una zona specifica dello stesso spazio chimico è una libreria focalizzata a bassa diversità. Nell'esempio qui descritto, la diversità è misurata in base al peso molecolare e alla lipofilia dei composti; ripartizioni nello spazio chimico basate su altre proprietà sono egualmente possibili. Sia la diversità che la 'similarità' possono essere valutate tanto fra singole molecole quanto fra i componenti di intere librerie usando moderne tecniche e programmi chemioinformatici.

Una 'libreria in soluzione' si prepara attraverso reazioni chimiche in soluzione, cioè in fase omogenea. Una 'libreria su fase solida' si prepara su supporti polimerici sferici, utilizzando metodologie e reazioni in fase eterogenea (v. Merrifield, 1963). Una 'libreria di discreti' si prepara come un insieme di prodotti distinti e separati attraverso la cosiddetta 'sintesi parallela', che utilizza strumenti parzialmente o totalmente automatizzati e prevede l'aggiunta contemporanea di diversi reagenti in diversi reattori e la lavorazione simultanea, cioè in parallelo, di ogni reattore di reazione. Una 'libreria in miscela', infine, si prepara come un insieme di piccole miscele di composti (pools) ciascuna strutturalmente determinata e contenente parte degli individui che costituiscono l'intera libreria.

La struttura generica di una libreria è una formula che rappresenta, attraverso l'uso di radicali non definiti R, la struttura di tutti gli individui componenti la libreria stessa. Un elemento strutturale comune è quello che, essendo presente in ogni componente di una libreria, la contraddistingue strutturalmente; esso può essere un legame chimico iterato, come avviene nelle librerie peptidiche, o un gruppo funzionale, come nelle librerie di ammidi o di esteri, oppure un sistema ciclico, come nelle librerie di benzodiazepine. Si definisce 'classe di monomeri' un gruppo di reagenti simili, chiamati appunto monomeri, contenenti lo stesso gruppo funzionale che serve, nello schema di reazione che conduce alla sintesi della libreria, a formare un elemento strutturale comune, oppure a decorarlo. Un punto di diversità è una posizione nella struttura generica che varia a seconda del monomero utilizzato per creare un particolare componente della libreria.

Il processo di messa a punto combinatoriale adatta le condizioni sperimentali di uno schema di sintesi riferito a una molecola specifica per poterlo applicare alla preparazione di una libreria combinatoriale la cui struttura è ispirata alla molecola stessa. Questo processo può comprendere il trasferimento dello schema di reazione dalla soluzione alla fase solida e l'adattamento delle condizioni di reazione all'uso di monomeri che presentano varie reattività e stabilità. La validazione dei monomeri verifica se ognuno di quelli scelti in una classe è compatibile con lo schema di sintesi combinatoriale messo a punto; nel caso in cui la compatibilità non sia verificata, il monomero stesso verrà escluso. Una libreria modello è una versione in miniatura, tipicamente composta da 10 ÷ 20 individui, della libreria combinatoriale bersaglio di un progetto; essa viene preparata utilizzando lo schema combinatoriale messo a punto e viene caratterizzata analiticamente in maniera esaustiva per verificare la presenza e la purezza di ogni componente. Solo se la libreria modello è preparata con successo si passa alla sintesi della libreria bersaglio completa. Il processo di caratterizzazione analitica di una libreria combinatoriale ne determina la qualità mediante l'analisi di un numero statisticamente significativo di discreti (per le librerie di discreti) o di miscele (per le librerie in miscela). Una libreria contenente l'80% dei componenti previsti a un livello adeguato di purezza è una libreria di buona qualità, purché sia noto quali composti formino il restante 20% a bassa qualità, che verrà poi scartato. Il processo di purificazione combinatoriale di una libreria sottopone simultaneamente, o in un ridotto numero di cicli iterativi, tutti i componenti della libreria a metodi di purificazione parzialmente o totalmente automatizzati (separazione, estrazione, ecc.).

La determinazione ad alta capacità (HTS) dell'attività di una libreria combinatoriale misura l'attività sul saggio di interesse per il progetto di ogni componente della libreria (discreto o miscela) contenuto in un pozzetto, o microcontenitore (microwell); il saggio è di natura biologica nel caso di ricerche farmaceutiche, analitico o fisico-chimico nel caso di studi riguardanti i nuovi materiali e la catalisi, e così via. La determinazione strutturale ad alta capacità di uno o più composti attivi collega il dato chimico (libreria, struttura degli individui che la compongono) a quello biologico (saggio di ogni composto o miscela di composti) e consente l'accelerazione del processo di scoperta di nuovi principî attivi.

4. Applicazioni

a) Ricerca farmaceutica

La ricerca farmaceutica è in continua evoluzione sin dalla sua nascita, con l'ovvio scopo di fornire al paziente farmaci nuovi e sempre migliori. Questa evoluzione, però, ha avuto anche riflessi negativi sulla produttività e sulla competitività delle aziende del settore: ricordiamo, ad esempio, che una maggiore concorrenza e una sempre maggiore attenzione verso i bisogni del paziente da parte degli organismi nazionali e sovranazionali preposti alla tutela della salute possono anche portare a un aumento della documentazione necessaria per la valutazione e la registrazione di nuovi principî attivi.

Due dati numerici possono far comprendere come la ricerca farmaceutica rappresenti un settore sempre più competitivo e costoso per le aziende in essa coinvolte. Il costo medio per l'introduzione sul mercato internazionale di un nuovo farmaco è decuplicato, passando dai circa 50 milioni di dollari del 1976 fino ai circa 500 milioni di dollari attuali. Inoltre, il tempo necessario per lo sviluppo di un farmaco, dall'inizio di un progetto di ricerca fino alla commercializzazione del principio attivo, è quasi raddoppiato dal 1960 a oggi, arrivando in media ai 14 ÷ 15 anni: considerando che un brevetto ha una vita di 20 anni e che l'elevata competizione del mercato obbliga a brevettare strutture a potenziale attività terapeutica ancora in fase esplorativa, la finestra temporale di sfruttamento esclusivo di un farmaco si è ridotta enormemente. Una riduzione dei costi e dei tempi di scoperta e di sviluppo del farmaco è quindi un obiettivo cruciale, perseguito con metodi fra i quali la chimica combinatoriale ha un ruolo di spicco (v. farmaci, progettazione dei).

Si usa dividere il processo di scoperta di un farmaco in una fase di ricerca, a carattere più esplorativo, e in una fase di sviluppo, al termine della quale viene ottenuto il farmaco che andrà sul mercato. Mentre lo sviluppo è poco influenzato dall'avvento della chimica combinatoriale e, più in generale, da altre tecnologie ad alta produttività, la ricerca farmaceutica ne ha tratto considerevole giovamento: vediamo come e dove, esaminando le sue fasi principali.

L'identificazione e la validazione di un bersaglio molecolare sono attività di competenza prevalentemente biologica, nelle quali la chimica combinatoriale gioca un ruolo di supporto, anche se di recente la commistione fra chimica combinatoriale, genetica e biologia ha aperto enormi potenzialità alla ricerca farmaceutica (v. Stockwell, 2000; v. Seneci, 2002).

Di seguito ha luogo la ricerca di un principio attivo, cioè la sintesi e la valutazione di molte molecole chimiche per determinarne l'attività sul bersaglio molecolare validato. La possibilità di testare un gran numero di molecole preparate in poco tempo e in piccola quantità (meno di un milligrammo ciascuna) riduce i costi e i tempi necessari per l'identificazione di principî attivi; queste molecole vengono oggi preparate usando metodiche combinatoriali. Le librerie più adatte a questo scopo sono quelle primarie. All'inizio degli anni novanta erano molto utilizzate librerie sintetiche e biologiche composte da macromolecole naturali, per lo più peptidi; spesso erano preparate in miscela, usando il metodo 'dividi e miscela' su fase solida ed erano formate da centinaia di migliaia, se non milioni, di composti. In seguito, sia il basso grado di diversità chimica che la difficoltà di sviluppare farmaci da principî attivi peptidici hanno spostato l'interesse verso librerie sintetiche composte da molecole organiche caratterizzate da un peso molecolare non elevato, da proprietà fisico-chimiche tali per cui sono biodisponibili, da una buona stabilità e da bassa reattività; si tratta di caratteristiche che le rendono sicure, in poche parole, hanno molte più probabilità di diventare farmaci. In aggiunta, le librerie in miscela hanno spesso dato problemi nell'identificazione dei componenti attivi, perché le attività misurate si sono a volte rivelate degli artefatti non riproducibili (falsi positivi) o, viceversa, non sono stati identificati dei prodotti attivi (falsi negativi). Questi e altri inconvenienti hanno portato a privilegiare le librerie di discreti, preparate sia in fase solida che in soluzione; il numero di individui in esse contenuto, selezionati usando metodi chemioinformatici che garantiscono alla libreria l'alto grado di diversità necessario per esplorare lo spazio chimico utile ad applicazioni farmaceutiche pur sempre grande, è calato fino a poche migliaia. Rispetto alla preparazione di librerie polipeptidiche, è pertanto necessaria una migliore messa a punto combinatoriale per ottenere librerie di piccole molecole organiche; la sintesi di queste ultime implica infatti le più svariate trasformazioni chimiche organiche e un gran lavoro sia chemoinformatico che sperimentale nella validazione dei monomeri scelti fra la gamma di prodotti commercialmente disponibili con le funzionalità chimiche necessarie.

Strumenti parzialmente o totalmente automatizzati per la sintesi, la caratterizzazione analitica e la purificazione combinatoriale, insieme a nuovi software applicativi, permettono la rapida esecuzione dei passaggi necessari alla sintesi di librerie diverse. Per riassumere, nel corso degli anni novanta l'interesse prevalente si è spostato dalla produzione di singole librerie di centinaia di migliaia di componenti peptidici in miscela su fase solida a quella di decine, se non centinaia, di librerie composte da un numero contenuto di piccole molecole organiche. Ognuna di esse è basata su un diverso nucleo strutturale comune e il loro insieme costituisce una collezione di composti diversi per la ricerca di nuovi principî attivi; la somma dei componenti di queste librerie non eccede la taglia di una sola libreria peptidica a basso grado di diversità.

L'ottimizzazione del principio attivo ne modifica la struttura attraverso la sintesi di analoghi, il migliore dei quali (definito spesso 'candidato preclinico') possiede non solo una buona attività sul bersaglio molecolare, ma anche un profilo fisico-chimico, farmacocinetico e tossicologico adatto a un farmaco. La sintesi rapida di questi analoghi in quantità ridotte, seppur maggiori rispetto alla fase precedente (quantificabili intorno ai 3÷5 milligrammi per composto), è realizzata al meglio utilizzando di nuovo tecniche combinatoriali. Le librerie più adatte a questo scopo sono le librerie focalizzate. In questo caso si selezionano i componenti della libreria per la loro similarità chimica con il principio attivo da ottimizzare, e al tempo stesso si introducono variazioni strutturali che esplorino le relazioni struttura-attività per il chemiotipo in questione. Il numero dei componenti di queste librerie eccede raramente il migliaio, restando per lo più intorno a poche centinaia; i risultati biologici ottenuti dalla prima libreria focalizzata sono utilizzati per disegnarne una seconda, più ridotta di numero, e così via fino alla selezione di un candidato preclinico. Queste librerie privilegiano la sintesi di discreti, piuttosto che di miscele, operando in soluzione anziché su fase solida. Spesso la loro sintesi è successiva alla preparazione e al saggio biologico di librerie primarie da cui il principio attivo è stato caratterizzato, quindi la messa a punto della strategia sintetica prescelta è ridotta, se non addirittura assente, e tecniche di lavorazione e purificazione più complesse e meno automatizzabili sono ritenute accettabili. Si ricorre anche spesso a monomeri altamente funzionalizzati e non commercialmente disponibili, preparati attraverso elaborate strategie, per dare più originalità e valore alle librerie focalizzate.

Infine, la valutazione preclinica promuove il candidato preclinico ottenuto dalla precedente fase di ottimizzazione (o un suo analogo estremamente simile) a candidato clinico pronto per lo sviluppo farmaceutico. In questa fase si richiede la preparazione di pochissime entità chimiche, e quindi le tecniche combinatoriali non hanno una grande rilevanza.

Possiamo approssimativamente valutare in 1 ÷ 2 anni il tempo risparmiato in ricerca farmaceutica per l'identificazione di un candidato clinico usando l'approccio della chimica combinatoriale, e ciò si accompagna a una significativa riduzione del costo dei singoli composti preparati nell'intera fase. È altrettanto importante sottolineare che la sintesi di un maggior numero di prodotti durante il processo di scoperta e di ottimizzazione di un nuovo principio attivo aiuta a identificare più in fretta eventuali ragioni per bloccare il progetto; ciò consente di risparmiare tempo e denaro da investire su progetti che hanno maggior probabilità di successo.

b) Catalisi

I processi catalitici sono da lungo tempo parte integrante della chimica, in particolare della chimica industriale. La ricerca di nuovi sistemi catalitici, o di sistemi catalitici migliori per reazioni catalizzate, è di estrema attualità in campo sia scientifico che industriale. Storicamente, gli sforzi di innovazione nel settore si sono sviluppati sulla base della conoscenza acquisita nel passato (sistemi catalitici noti esaminati in nuove reazioni), e, più in generale, in maniera molto pragmatica; la conoscenza teorica generale dei processi catalitici e delle classi strutturali di catalizzatori omogenei ed eterogenei non è paragonabile a quella a disposizione nella ricerca farmaceutica, che si traduce nella progettazione razionale di nuovi farmaci su molti tipi di bersagli molecolari. Le tecniche sintetiche combinatoriali permettono di accumulare un maggior numero di dati relativi all'influenza di molte variabili importanti nei processi di catalisi (temperatura, concentrazione, solvente, ligandi, natura del catalizzatore, ecc.) e questi aiuteranno a comprenderne meglio i principî sottostanti e ad accelerare sia la scoperta di sistemi catalitici nuovi attraverso librerie primarie (analogamente alla ricerca di un principio attivo farmaceutico), sia l'ottimizzazione di sistemi catalitici esistenti attraverso librerie focalizzate (analogamente all'ottimizzazione strutturale del principio attivo nella ricerca farmaceutica).

Le prime pubblicazioni riguardanti l'applicazione dell'approccio combinatoriale alla catalisi omogenea (v. Liu ed Ellman, 1995; v. Burgess e altri, 1996) o eterogenea (v. Moates e altri, 1996; v. Holzwarth e altri, 1998) sono molto recenti. Ci si potrebbe chiedere perché metodiche così promettenti siano state applicate per la prima volta alla catalisi più di dieci anni dopo il loro ingresso nella ricerca farmaceutica; la risposta è semplice: mentre saggi biologici ad alta numerosità per valutare l'attività farmacologica di librerie combinatoriali erano già disponibili negli anni ottanta, saggi per misurare l'attività catalitica di librerie di catalizzatori omogenei o eterogenei erano praticamente sconosciuti. Solo recentemente si sono registrati dei progressi legati soprattutto allo sviluppo di metodi analitici e di strumentazioni parzialmente o totalmente automatizzati: la resa e la purezza del prodotto di una trasformazione catalizzata possono essere misurate usando la spettroscopia di massa, la spettrometria di risonanza magnetica nucleare, la spettrometria all'infrarosso e la cromatografia liquida, per citare solo i metodi più comuni. Molti approcci capaci di combinare creatività scientifica e utilità pratica sono stati riportati in letteratura di recente, e alcune aziende (soprattutto statunitensi) si sono specializzate nella cosiddetta 'catalisi combinatoriale'; tuttavia, nonostante i molti progressi, librerie di centinaia di migliaia di individui non sono proponibili per valutazioni accurate e affidabili dell'attività catalitica di ogni loro componente.

Le dimensioni più comuni delle librerie combinatoriali catalitiche variano da poche centinaia a poche migliaia di componenti, quasi sempre preparati come discreti. La loro natura è molto diversa a seconda dello scopo preciso del progetto al quale le librerie si riferiscono. La prima distinzione che si può operare è quella fra le librerie per catalisi omogenea e quelle per catalisi eterogenea: esamineremo brevemente le prime, mentre le seconde saranno trattate nel paragrafo successivo, insieme alle librerie di nuovi materiali.

Nella catalisi omogenea sono comuni sistemi catalitici composti da un metallo e da un ligando di coordinazione, la cui efficienza è fortemente condizionata dalla temperatura, dal tipo di solvente e dalla concentrazione del sistema catalitico. Sono stati riportati esempi di librerie che mirano all'ottimizzazione di uno solo dei fattori determinanti ai fini dell'effetto catalitico; il caso più frequente è quello di librerie sintetiche organiche di ligandi, valutate per l'aumento di resa o di purezza del prodotto, o per un aumento di enantioselettività di sintesi di composti chirali. Altre librerie modificano contemporaneamente più di un parametro, fino ad arrivare a permutazioni esaustive di tutte le variabili sopra citate, fermo restando l'obbligo di non eccedere nei numeri per non sovraccaricare il sistema di valutazione dell'efficacia catalitica della libreria. È interessante notare come due componenti di queste ultime librerie possano variare anche solo per la concentrazione del catalizzatore, o del ligando, o per la natura del solvente; la loro composizione chimica è quindi identica, ma restano due individui distinti in grado di indirizzare la scelta finale di un sistema catalitico ottimizzato.

c) Nuovi materiali

Nel 1970 fu pubblicato un lavoro che rappresenta la prima libreria sintetica riportata in letteratura, sia pur costituita da soli tre componenti generati con tecniche di deposizione di miscele di ossidi di metalli, e analizzata per le sue proprietà simultaneamente, cioè in maniera combinatoriale (v. Hanak, 1970). Le tecniche di preparazione di tali materiali, in cui piccole aree della superficie di deposizione differiscono per il maggiore o minore contenuto dei monomeri inorganici scelti, si sono rapidamente evolute, portando a materiali compositi che avrebbero potuto essere concepiti e trattati come vere e proprie librerie combinatoriali inorganiche. Il primo lavoro che applica l'approccio combinatoriale alla ricerca di nuovi materiali inorganici è tuttavia molto più recente (v. Briceno e altri, 1995): come già per la catalisi, la difficoltà di prevedere la valutazione delle proprietà di una libreria in maniera rapida e accurata per ognuno dei suoi componenti, o meglio per ogni microarea del materiale a strato sottile depositato, ha rallentato lo sviluppo di tecniche sintetiche, analitiche e valutative adeguate.

Ora questo ritardo è stato ampiamente superato e librerie contenenti fino a svariate decine di migliaia di componenti sono state riportate in lavori e brevetti internazionali; in ogni lavoro sono stati identificati e caratterizzati nuovi materiali con proprietà catalitiche, ottiche, paramagnetiche, elettriche (solo per citare alcuni settori di grande rilevanza). L'aumentata produttività si è dimostrata importante, considerando che minime variazioni nella composizione in uno dei monomeri, o in uno dei droganti, hanno prodotto proprietà molto diverse nei materiali compositi analizzati; una volta di più la chimica combinatoriale dà accesso a un numero di dati molto maggiore su cui costruire ipotesi per razionalizzare il comportamento di materiali di diversa composizione. I metodi di valutazione di attività utilizzano tecniche analitiche, spesso combinate con processi e strumenti automatizzati e miniaturizzati: si pensi che le dimensioni di un'intera libreria di un migliaio di composti sono dell'ordine dei 4 ÷ 5 cm², e ciò richiede, oltre a un'estrema precisione nella deposizione dei monomeri inorganici componenti la libreria, anche sensibilità e risoluzione spaziale elevatissime della tecnica analitica prescelta per caratterizzare un individuo su una superficie di pochi mm² senza incorrere in interferenze con altri individui che si trovano a distanze di pochi mm.

5. Conclusioni

La ricerca chimica è da sempre parte integrante dell'innovazione e del progresso intesi come miglioramento delle condizioni di vita del genere umano. La chimica combinatoriale si è rivelata uno strumento prezioso per accelerare la scoperta di nuovi principî attivi in farmacologia. È lecito attendersi ora un periodo in cui approcci combinatoriali prenderanno piede in aree applicative fino a ora in parte trascurate (ad esempio, l'industria cosmetica e quella agroalimentare), e soprattutto un periodo di grandi avanzamenti scientifici e tecnologici. È facile prevedere che automazione e miniaturizzazione faranno progressi tali da permettere la sintesi e la valutazione rapida di librerie numerose, nonché l'isolamento di principî attivi in scala microscopica attraverso un laboratorio delle dimensioni di un transistor per computer, il cosiddetto lab-on-a-chip. Questo laboratorio del futuro avrà spazio in abbondanza per la chimica combinatoriale, con implicazioni oggi inimmaginabili: questa previsione può sembrare azzardata, ma altrettanto azzardato sarebbe stato per un chimico 20 anni fa immaginare la sintesi di 25.000 composti inorganici discreti su un supporto solido non più grande di un francobollo, oppure la sintesi e la valutazione biologica di librerie di decine di migliaia di composti organici in una sola settimana.

bibliografia

Briceno, G. e altri, A class of cobalt oxide magnetoresistance materials discovered with combinatorial synthesis, in "Science", 1995, CCLXX, pp. 273-275.

Burgess, K. e altri, New catalysts and conditions for a C-H insertion reaction identified by high throughput catalyst screening, in "Angewandte Chemie. International edition", 1996, XXXV, pp. 220-222.

Furka, A., Study on possibilities of systematic searching for pharmaceutically useful peptides, notarized document file number 36237/1982, Budapest, 1982.

Geysen, H. M., Use of peptide synthesis to probe viral antigens for epitopes to a resolution of a single amino acid, in "Proceedings of the National Academy of Sciences", 1984, LXXXI, pp. 3998-4002.

Hanak, J. J., The "multiple-sample concept" in material research: synthesis, compositional analysis and testing of entire multicomponent systems, in "Journal of materials science", 1970, V, pp. 964-971.

Holzwarth, A., Schmidt, H. W., Maier, W. F., Detection of catalytic activity in combinatorial libraries of heterogeneous catalysts by IR thermography, in "Angewandte Chemie. International edition", 1998, XXXVII, pp. 2644-2647.

Houghten, R. A., General method for the rapid solid-phase synthesis of large number of peptides. Specificity of antigen-antibody interaction at the level of individual amino acids, in "Proceedings of the National Academy of Sciences", 1985, LXXXII, pp. 5131-5135.

Liu, G., Ellman, J. A., A general solid-phase synthesis strategy for the preparation of 2-pyrrolidinemethanol ligands, in "The journal of organic chemistry", 1995, LX, pp. 7712-7713.

Merrifield, R. B., Solid-phase peptide synthesis. I. The synthesis of a tetrapeptide, in "Journal of the American Chemical Society", 1963, LXXXV, pp. 2149-2154.

Moates, F. C. e altri, Infrared thermographic screening of combinatorial libraries of heterogeneous catalysts, in "Industrial and engineering chemistry research", 1996, XXXV, pp. 4801-4803.

Seneci, P., Combinatorial chemistry: basic principles and new trends, in "La chimica e l'industria", 1998, LXXX, pp. 1183-1189.

Seneci, P., Solid-phase synthesis and combinatorial technologies, New York: Wiley & Sons, 2000.

Seneci, P., Sinergie tra chimica, genomica e proteomica, in "La chimica e l'industria", 2002, LXXXIV, pp. 832-834.

Stockwell, B. R., Chemical genetics: ligand-based discovery of gene function, in "Nature reviews genetics", 2000, I, pp. 116-125.

Terrett, N. K., Combinatorial chemistry, New York: Oxford University Press, 1998.